Fichier KrosChambrePression.doc
Personne référente :

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Cette technique permet d’imposer une pression hydrostatique à une rosette excisée et de mesurer un flux volumique d’eau à partir duquel on peut déterminer la conductivité hydraulique de la rosette (Kros)

Dispositif expérimental

1. Faire un montage qui sera conservé pendant toute la manip sans démontage à chaque changement de plante :

Pour cela, sceller un tuyau flexible dans le bouchon de la chambre et positionner l’ensemble dans le couvercle

2. Préparer les adaptateurs (cônes de P200 ou P1000 étirés) pemettant d’insérer les capillaires dans le tube en PVC souple : Couper un cône afin d’obtenir un petit tube éffilé du diamètre du tube en PVC souple. Avec de la pâte dentaire (Coltène, Président Microsystem), fixer un capillaire dans ce cône effilé. Ce capillaire ne servira qu’une seule fois. Préparer plusieurs adaptateurs pour la journée.

3. Transporter les plantes de la chambre de culture à la chambre à pression dans un pot contenant de la solution d’hydroponie.

4. Installation de la rosette :
couper la hampe et les racines de telle sorte que celles-ci remplissent les 3/4 du tube PVC souple.

Remplir de pâte dentaire presque jusqu’à l’extrémité de la racine (1)
et faire un bouchon étanche entre la rosette et la racine (2).
Plus le tube en PVC souple est rempli de matière (pâte dentaire + racines), plus la mesure sera courte car la capacité du tube PVC est réduite.
Couper éventuellement les feuilles cassées et colmater avec de la pâte dentaire ainsi qu’aux points de coupure des hampes.
Appuyer 30 sec sur la rosette avec le dos de la pince après avoir mis la pâte dentaire pour bien l’enfoncer et laisser sécher 10′ dans un pot copro rempli de solution standard (MH).

5. Transférer l’ensemble dans la chambre à pression, la rosette plongeant dans la solution MH. Bien fermer la chambre.

6. Ajuster la pression dans la chambre grâce à une bouteille d’azote contrôlée par un manomètre. Un temps d’équilibration à pression fixe est nécessaire à la stabilisation du flux d’eau exsudé. Attendre 5 minutes à une pression constante avant de vérifier la stabilité du flux.

7. Placer un capillaire gradué de 50 µl sur le tube en PVC souple. Ne pas hésiter à appuyer à l’aide d’une pince. La graduation du capillaire permet de mesurer le flux de sève.

8. Mesures :

Deux types de mesures peuvent être réalisées :

– Un premier type s’effectue à une pression constante.
Il permet de suivre l’évolution du flux de sève au cours du temps, notamment lors de l’application de traitements de faible pression osmotique.

– Le second type de mesure s’effectue à plusieurs pressions imposées successivement (320 ; 160 ; 240 kPa)
Il est adapté aux mesures de Kros

9. Une fois les mesures effectuées, les feuilles et les bouts de hampes de la rosette translucides, c’est à dire ceux qui ont été traversés par un flux d’eau sont scannés puis mis à sécher dans un four à 80°C pendant au moins 24 heures. Leur surface est mesurée à l’aide d’un logiciel et leur poids sec est déterminé à l’aide d’un balance standard.

Calcul de la Kros

La relation usuellement observée entre le flux de sève exsudée (Jv) et le gradient de pression appliqué dans la chambre (P) est linéaire. L’équation qui suit traduit une relation simple entre le flux et la force :

où S est la surface d’échange, Kros la conductivité hydraulique et dP le gradient de potentiel. La régression linéaire des points expérimentaux ou la valeur absolue du flux permet donc d’obtenir une valeur de conductance hydraulique de la rosette que l’on peut rapporter à la surface afin d’obtenir une conductivité hydraulique surfacique, exprimée en µl.m-2.h-1.MPa-1.

Solution MH

KNO3		1.25 mM
MgSO4		0.75 mM
Ca(NO3)2		1.5 mM
KH2PO4		0.5 mM
MES		10 mM
KOH		pH 6.0