Fichier ChambrePression.doc
Personne référente :
Cette technique permet d’imposer une pression hydrostatique à un appareil racinaire
excisé et de mesurer un flux d’eau à partir duquel on peut calculer la conductivité hydraulique hydrostatique de la racine
Dispositif expérimental :
1. Transporter les plantes de la chambre de culture à la chambre à pression dans un pot contenant de la solution d’hydroponie.
2. Décapiter les plantes au niveau de l’hypocotyle avec une lame de rasoir neuve et introduire la partie sectionnée portant les racines dans le joint du couvercle de la chambre.
3. Préparer les adaptateurs (cônes de P200 étirés) : Faire ramollir le cône à la flamme puis étirer doucement en tirant (Vérifier si l’air passe à l’aide d’une pissette dans l’eau). Couper les adaptateurs aux extrémités.
4. Fixer un adaptateur sur l’hypocotyle (cône de P200 étiré) et solidariser au joint par de la pâte dentaire (Coltène, Président Microsystem) afin d’étanchéifier le système. Pour cela, mettre de la résine autour de l’adaptateur afin de rendre le système imperméable; attendre deux minutes. Mettre de la résine au fond du trou du joint tout en enfonçant l’adaptateur. Ne pas hésiter sur la quantité.
5. Déposer de la résine au dessus du rond blanc et coller une rondelle dorée. Boucher les trous avec de la résine. Attendre 10 minutes. Vérifier que la résine est bien sèche.
6. Transférer l’ensemble dans la chambre à pression, les racines plongeant dans la même solution que celle du traitement ou solution MH
Bien fermer la chambre.
7. Ajuster la pression dans la chambre grâce à une bouteille d’azote contrôlée par un manomètre. Un temps d’équilibration à pression fixe est nécessaire à la stabilisation du flux de sève exsudé : attendre 10 minutes à une pression de 320 kPa
8. Placer un capillaire gradué de 50 µl sur l’adaptateur en assurant l’étanchéité à l’aide de lanoline. La graduation du capillaire permet de mesurer le flux de sève.
Mesures :
Deux types de mesures sont réalisées :
– Un premier type s’effectue à la pression constante de 320 kPa.
Il permet de suivre l’évolution du flux de sève au cours du temps, notamment lors de l’application de traitements de faible valeur osmotique.
– Le second type de mesure s’effectue à plusieurs pressions imposées successivement (320 ; 240 ; 160 kPa)
Il est adapté aux mesures lors de traitements modifiant le potentiel osmotique de la solution qui baigne les racines.
Une fois les mesures effectuées, les racines sont déshydratées dans un four à 80°C pendant au moins 24 h et leur poids sec est déterminé.
Calcul de la LPr
La relation usuellement observée entre le flux de sève exsudée (Jv) et le gradient de pression appliqué dans la chambre (P) est linéaire. L’équation qui suit traduit une relation simple entre le flux et la force :
où S est la surface d’échange, Lp la conductivité et dX un gradient de potentiel;
ici dX= .P.
La régression linéaire des points expérimentaux ou la valeur absolue du flux permet donc d’obtenir une valeur de conductance hydraulique racinaire que l’on peut rapporter au poids sec racinaire pour obtenir une conductivité hydraulique, exprimée en ml.g-1.h-1.MPa-1.
Solution MH
| KNO3 | 1.25 mM |
| MgSO4 | 0.75 mM |
| Ca(NO3)2 | 1.5 mM |
| KH2PO4 | 0.5 mM |
| MES | 10 mM |
| KOH | pH 6 |