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Personne référente : Brigitte Touraine
Travailler impérativement sous sorbonne avec protection cutanée
Ammonium persulfate : 10% (P/V) dans H2O extemporanément
Temed : Ci solution mère du commerce Cf 0.05%
Acrylamide 40% : Conservation à 4°C
Mélange du commerce Acrylogel 2.6 en solution (Acryl-bis à 40%, rapport 37:1)
SDS 20% : Conservation à 25°C
Acheté dans le commerce – ne pas utiliser de poudre
Tris Tricine 10X : Conservation à 4°C
| PM | Cf | 1 litre | |
|---|---|---|---|
| Tris | 121,14 | 1 M | 121,14 g |
| Tricine | 75,07 | 1 M | 179.17 g |
Tris-glycine 10X : Conservation à 4°C
| PM | Cf | 1 litre | |
|---|---|---|---|
| Tris | 121,14 | 0,25 M | 30,28 g |
| Glycine | 75,07 | 1,92 M | 144 g |
TRIS-HCl 1,5 M pH 8,8 : (ajuster le pH avec Hcl 5N) Conservation à 4°C
| PM | 100 ml | 200 ml | |
|---|---|---|---|
| Tris | 121,14 | 18,17 g | 36,64 g |
TRIS-HCl 0,5 M pH 6,8 : (ajuster le pH avec HCl 5N) Conservation à 4°C
| PM | 50 ml | 100 ml | |
|---|---|---|---|
| Tris | 121,14 | 3,03 | 6,06 |
Tampon de solubilisation : Conservation en aliquotes à -20°C
| PM | 10 ml | 10 ml | ||
|---|---|---|---|---|
| 2X | 2X | 4X | 4X | |
| Tris-HCl pH 6,8 0,5 M | 125 mM | 2,5 ml | 250 mM | 2,5 ml de 1M |
| SDS (20%) | 4% | 2 ml | 8% | 2.5 ml 20% |
| DTT | 200 mM | 0.31 g | 400 mM | 0.62 g |
| Glycérol | 20% | 2 ml | 40% | 4 ml |
| Bl. de Bromophénol | 0,02% | 2 mg | 0,04% | 4 mg |
| qsp H2O (si on utilise β-mercapto) | 9 ml | 8 ml |
On peut aussi utiliser du β-mercapto à la place du DTT. Il doit être à 200 mM dans le tampon
Solutions diverses :
Bleu de bromophénol 0,2% : 20 mg dans 10 ml d’eau
HCl 5 N : 20 ml de HCl pur dans 30 ml d’eau (50 ml au total)
rouge Ponceau : 0,4% rouge (P/V)dans 1% acide acétique