Personne référente : Angélique Adiveze
Milieux de culture avec différentes concentrations de nitrate pour Arabidopsis thaliana : Mettre des gants et une blouse, mesurer l’acide acétique sous la sorbonne
Solutions stocks :
| CaSO4 2H2O (10 mM) | 1.70 g/l (environ 1 h pour dissoudre la poudre) |
| KCl (100 mM) | 7.46 g/l |
| KH2PO4 (100 mM) | 13.61 g/l |
| KNO3 (200 mM) | 20.22 g/l |
| MgCl2 6H2O (50 mM) | 10.17 g/l |
| NaFeEDTA (50 mM) | 9.7 g/l |
| MES (250 mM) | 50 g/l |
Autoclaver les solutions dans des bouteilles d’un litre et les conserver à 4°C
Oligo : x 1000 Quantités nécessaires pour 500 ml de solution :
| H3Bo3 (50 mM) | 1.55 g |
| MnCl2 4H2O (12 mM) | 1.19 g |
| CuCl2 2H2O (1 mM) | 0.086 g |
| ZnCl2 (1 mM) | 0.068 g |
| NH4Mo 4H2O (0.03 mM) | 0.02 g |
Ne pas autoclaver, alicoter dans des tubes de 10ml et conserver à -20°C
Préparation des milieux de culture pour 1 litre :
| Composition en ml | 1 litre | 1 litre | 1 litre |
|---|---|---|---|
| NITRATE | 0 mM | 1 mM | 10 mM |
| CaSO4 | 50 ml | 50 ml | 50 ml |
| KNO3 | 5 ml | 50 ml | |
| MgCl2 | 10 ml | 10 ml | 10 ml |
| KH2PO4 | 10 ml | 10 ml | 10 ml |
| NaFeEDTA | 1 ml | 1 ml | 1 ml |
| Oligo | 1 ml | 1 ml | 1 ml |
| MES | 10 ml | 10 ml | 10 ml |
Une fois le milieu préparé, ajuster le pH à 5.7 (initial 4.3-4.7) avec KOH
Agar Type E (Sigma) : 8 g/<l
Mettre l’agar dans la bouteille, et verser la solution après avoir mesuré le pH.
Autoclaver
Références des produits :
| Sigma | Euromedex | |||
|---|---|---|---|---|
| CaSO4 2H2O | C3771 | MgCl2 6H2O | 2189 | |
| KNO3 | P8291 | KH2PO4 | 2018 | |
| NaFeEDTA | E6760 | MES | EU0033 | |
| MnCl2 4H2O | 221279 | H3BO3 | 50765 | |
| CuCl2 2H2O | 61174 | |||
| ZnCl2 | 208086 | |||
| (NH4)6Mo7 O24 4H2O | A7302 | |||
| Agar type E | A4675 | |||
| KOH | P5958 | |||