Séminaire IBIP
Les séminaires ont lieu sur le Campus Montpellier SupAgro/INRA de La Gaillarde (2, place P. Viala Montpellier)

Jeudi 21 mars 2013
Salle 106 (Cœur d’Ecole) à 14h

La microscopie de fluorescence résolue dans le temps et l’étude des interactions, in planta, entre partenaires protéiques

Alain Jauneau
Plate-forme Toulouse RIO Imaging, Centre INRA de Toulouse, Pôle de Biotechnologie Végétale, 31326 Castanet Tolosan Cedex

La durée de vie, τ, de la fluorescence à l’état excité est un paramètre caractéristique d’une sonde dans un environnement donné. Indépendant de la concentration locale en sonde, la mesure de ce paramètre permet de mettre en évidence des interactions entre partenaires protéiques in cellulo. La Plateforme TRI sur le site de la FRAIB (Fédération de Recherches Agrobiosciences, Interaction, Biodiversité) a mis en oeuvre un set-up expérimental couplant des sources de lasers pulsés, un statif de microscope et une streak caméra comme système de détection. Les photons de fluorescence sont distribués en fonction de leur temps d’arrivée sur l’axe des ordonnées. Chaque image unitaire est une image X, t. L’obtention de piles d’images X, t par déplacement d’un miroir galvanométrique permet de décrire un objet en 2D en X, Y. A partir des images acquises, on extrait des courbes de décroissance de l’intensité de fluorescence et après ajustement des courbes selon différents modèles, on détermine les durées de vie et des cartographies de τ.
Dans le domaine végétal, ce set-up a permis de mettre en évidence in vivo des interactions entre partenaires protéiques impliqués dans la résistance à des pathogènes. Les problèmes et difficultés de l’approche (choix du couple donneur accepteur, les ajustements…) seront abordés au cours de l’exposé.
Maud Bernoux et al., Plant Cell, 2008. Solène Froidure et al., PNAS, 2010. Céline Tasset, et al., PlosPathogens. 2010. Alexandre Perochon, et al., BBRC 2010. Joanne Canonne et al., Plant Cell, 2011. Katharina Heidrich et al., Science 2011. Stella Cesari et al., Plant Cell 2013. Rivas et al., Nature Comm 2013.


Contact : Geneviève Conéjéro

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